Une nouvelle dénervation rénale laparoscopique réduit immédiatement l’inductibilité de la fibrillation auriculaire : une étude sur un modèle porcin

Quatorze porcs ont été utilisés dans l’expérience. Deux porcs ont été utilisés pour tester et établir des protocoles de stimulation du nerf vague et des études électrophysiologiques. Trois porcs ont été utilisés pour tester le RDN laparoscopique. Enfin, neuf porcs ont été répartis au hasard dans le groupe fictif ou RDN. Toutes les expériences ont été approuvées par le comité institutionnel de protection et d’utilisation des animaux de l’hôpital universitaire national de Séoul (SNUH-IACUC) et les animaux ont été maintenus dans une installation accréditée par AAALAC International (n° 001169) conformément au Guide de soins et d’utilisation. des animaux de laboratoire, 8^ème édition, Conseil national de recherches (2010). L’étude a été rapportée conformément aux lignes directrices ARRIVE 2.0.

Préparation des animaux

Les porcs ont été mis à jeun pendant 12 heures avant l’expérience. L’anesthésie générale a été induite par injection intramusculaire de zoletil (5 mg/kg) et de xylazine (2 mg/kg). Après l’induction, l’intubation trachéale a été réalisée à l’aide d’une sonde endotrachéale et l’anesthésie a été maintenue en utilisant 2,0 à 2,5 % d’isoflurane par inhalation pendant les expériences. La ventilation mécanique a été ajustée pour maintenir la saturation en oxygène et le CO de fin d’expiration₂ à ≥ 98 % et 38 à 40 mmHg, respectivement. Des électrodes ont été fixées aux membres pour surveiller l’électrocardiogramme (ECG) au plomb II pendant l’expérience. Après anesthésie en décubitus dorsal, le cou et l’abdomen ont été désinfectés avec de la povidone iodée et drapés de manière aseptique.

Le processus de préparation des animaux est illustré sur la figure 4A. Une incision cutanée verticale a été pratiquée des deux côtés de la trachée entre le muscle sternohyoïdien et la face médiale du muscle sternocléidomastoïdien. Les tissus sous-cutanés ont été disséqués et la veine jugulaire interne et l’artère carotide ont été exposées. Les veines jugulaires droite et gauche ont été ponctionnées à l’aide d’une gaine 7-Fr. Un cathéter décapolaire a été introduit dans l’oreillette droite via la veine jugulaire, sous guidage fluoroscopique. Un cathéter décapolaire de la veine jugulaire droite a été utilisé pour enregistrer des électrocardiogrammes intracardiaques du côté latéral de l’oreillette droite. L’autre cathéter de la veine jugulaire gauche a été utilisé pour effectuer une stimulation en rafale au niveau de l’oreillette droite. La sortie de stimulation, avec un intervalle de stimulation de 400 ms, a été diminuée de 10 à 2 V et le cathéter décapolaire gauche a été positionné pour maintenir une stimulation stable. La stabilité de la stimulation a été confirmée à l’aide d’un ECG de surface et d’un électrogramme intracardiaque. L’artère carotide droite a été exposée et légèrement rétractée afin d’identifier le nerf vague droit.

Mesure de la période réfractaire efficace auriculaire et de l’induction de la FA

Le flux expérimental est présenté sur la figure 4B. Le seuil de capture de l’oreillette droite a été testé en diminuant la sortie de stimulation de 10 à 1 V. Pour l’expérience restante, la sortie de stimulation a été définie comme étant le double du seuil de capture. Après un train de huit S1 à 500 ms, S2 était donné à partir de 400 ms et diminuait de 10 ms jusqu’à atteindre l’AERP. L’AERP a été mesurée sur le côté latéral de l’oreillette droite. Le protocole a été répété trois fois pour confirmer l’AERP. Les enregistrements de stimulation cardiaque et d’électrogramme intracardiaque ont été réalisés à l’aide du système Prucka Cardiolab EP (GE Medical Systems, Fairfield, CT, USA).

L’induction de la FA a été réalisée par stimulation en rafale de l’oreillette droite à un intervalle de stimulation de 100 ms et une largeur d’impulsion de 1,0 ms sur 60 s. L’induction de la FA a été répétée plus de 10 fois avec un intervalle de repos de 60 s. Les épisodes de FA induits ont été confirmés par l’enregistrement d’un ECG de surface et d’un électrogramme intracardiaque, et la durée de chaque épisode de FA a été mesurée. Les épisodes de FA ont été définis comme des cas d’une durée ≥ 5 s, car les épisodes de tachycardie supraventriculaire moins de 5 s après la stimulation en rafale pourraient constituer des constatations non spécifiques. L’inductibilité de la FA a été définie comme le taux de réussite des tests d’induction de la FA et mesurée en pourcentage.

Pour les groupes factices et RDN, chaque porc a subi des tests d’induction AERP et AF avant et après la procédure (c’est-à-dire une procédure factice ou RDN laparoscopique pour le groupe factice ou RDN, respectivement). De plus, les tests d’induction AERP et AF ont été répétés avec et sans VNS.

Stimulation du nerf vagal

Considérant que la FA peut ne pas être facilement inductible par une stimulation auriculaire droite chez les porcs en bonne santé, nous avons utilisé le VNS pour promouvoir l’inductibilité de la FA chez les porcs en bonne santé. Dans cette étude, l’AERP et la durée des épisodes de FA ont été mesurées avec et sans VNS pour chaque porc. Le protocole de VNS était le suivant. Le nerf vague cervical droit était situé sous l’artère carotide. Une électrode de stimulation (modèle 6491, sonde de stimulation temporaire unipolaire pédiatrique ; Medtronic, Minneapolis, MN, États-Unis) a été placée et fixée au nerf vague. La VNS a été réalisée à l’aide d’un stimulateur Grass S88 (AM Systems). Le nerf vague a été stimulé avec une largeur d’impulsion de 0,2 ms et une fréquence de 20 Hz. La sortie de stimulation pour VNS a été ajustée entre 2 et 10 V pour obtenir une diminution de 10 % de la fréquence cardiaque sans instabilité hémodynamique significative. Un exemple de VNS est illustré sur la figure 4C. La durée du VNS était limitée à 30 s pour éviter les effets de saturation.

Procédures laparoscopiques RDN et fictives

Le RDN laparoscopique a été réalisé comme suit. Après drapage, une aiguille de Veress a été insérée à 5 cm vers la gauche ou la droite et à 2 cm caudale par rapport à l’ombilic, et du CO₂ a été insufflé dans la cavité abdominale. Les trocarts ont été placés comme suit : (1) un port de 12 mm à 2 cm caudal par rapport à l’ombilic et au bord latéral des muscles droits (pour la caméra) ; (2) un port de 12 mm situé à 7 cm du port de la caméra ; et (3) ports de 5 mm situés à 7 à 8 cm du côté du port de la caméra. La caméra laparoscopique visualisait la cavité intra-abdominale. L’artère rénale a été exposée après incision du fascia périrénal et dissection des tissus mous environnants. Les RDN circonférentiels ont été réalisés à l’aide d’un instrument laparoscopique de dénervation rénale HyperQure (DeepQure, Inc., Séoul, République de Corée) aux sites proximaux et distaux de l’artère rénale avec une distance minimale de 3 mm. Après avoir enveloppé l’artère rénale à l’aide d’une électrode située à l’extrémité de l’instrument, une énergie radiofréquence bipolaire a été délivrée à une température constante de 65 ° C pendant 70 s en une seule injection (Fig. 5). Lorsque l’artère rénale distale bifurquait, chaque branche était ablatée séparément. Cette procédure a été répétée pour le rein controlatéral. Après RDN, le fascia périrénal a été suturé et du CO intrapéritonéal₂ a été exsufflé. Les parois abdominales ont été fermées et un pansement occlusif a été appliqué. Pour la procédure fictive, toutes les procédures ont été réalisées comme dans le groupe RDN, à l’exception de la délivrance d’énergie radiofréquence.

Démonstration de la procédure laparoscopique RDN. (UN) Illustration schématique du nouveau système RDN laparoscopique. La pointe de l’instrument s’enroule autour de l’artère rénale et délivre une énergie radiofréquence à l’aide d’une paire d’électrodes bipolaires linéaires espacées de 2 mm l’une de l’autre (adaptées de Enquête sur le Clin Urol. 2020;61(1):107-113, avec l’aimable autorisation de Jeong CW, MD, PhD). (B) Vue laparoscopique de la procédure laparoscopique RDN. L’artère rénale est exposée après avoir coupé le péritoine et disséqué les tissus sous-cutanés périartériels (le panneau de gauche). Après avoir exposé l’artère rénale, le RDN est effectué aux sites proximaux et distaux de l’artère (les panneaux du milieu et de droite). RDN dénervation rénale.

Analyse des tissus

Après l’expérience, les porcs ont été complètement sédatifs sous anesthésie générale en utilisant 4 à 5 % d’isoflurane par inhalation et euthanasiés par une injection intraveineuse de chlorure de potassium (2 mmol/kg) dans la veine jugulaire interne. Par la suite, les artères rénales gauche et droite ont été collectées. L’artère rénale a été fixée avec du formol à 10 % et colorée à l’hématoxyline et à l’éosine. Après inclusion en paraffine, des coupes horizontales de l’artère rénale de 4 µm d’épaisseur ont été obtenues au niveau des sites d’ablation proximaux et distaux. L’immunohistochimie a été réalisée à l’aide d’un anticorps monoclonal de souris contre TH (Accurate Chemical & Scientific Corporation, Carle Place, NY, USA) pour visualiser les nerfs sympathiques rénaux. Les fibres nerveuses ont été comptées le long de l’adventice de l’artère rénale et comparées entre les groupes fictifs et RDN.

analyses statistiques

Selon les types de variables, les données sont affichées sous la forme n (%), moyenne ± écart type ou médiane (intervalle interquartile). Pour chaque porc, le test de rang signé de Wilcoxon a été réalisé pour comparer la paire d’AERP (ou durées AF) obtenues avant et après la procédure fictive ou RDN laparoscopique. L’association entre l’inductibilité de la FA et les procédures (RDN simulé ou laparoscopique) a été évaluée en calculant les rapports de cotes (OR) avec des intervalles de confiance (IC) à 95 %. Le Mann-Whitney U-un test a été effectué pour comparer le nombre de fibres nerveuses entre les groupes simulés et RDN. Des valeurs p bilatérales inférieures à 0,05 supposent le rejet de l’hypothèse nulle. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide d’IBM SPSS Statistics pour Windows (version 22.0 ; IBM Corp., Armonk, NY, USA).