Résumé
Arrière plan: La thérapie cellulaire est une approche thérapeutique potentielle pour les maladies neurodégénératives. Les cellules souches mésenchymateuses dérivées du sang de cordon ombilical humain (hUCB-MSC) sont une source appropriée de cellules souches à utiliser dans diverses thérapies cellulaires.
Objectifs: Dans cette étude, nous avons examiné une approche de PCR en temps réel pour la différenciation neuronale des hUCB-MSC in vitro.
Matériaux et méthodes: Les CSM ont été cultivées dans un milieu DMEM additionné de 10 % de FBS dans un incubateur humidifié à 5 % de CO2 et 37 °C. Pour la différenciation neuronale des MSC, le DMEM a été retiré et remplacé par un milieu de pré-induction (acide rétinoïque [RA]facteur de croissance basique des fibroblastes [bFGF]et facteur de croissance épidermique [EGF]) et milieu basal pendant deux jours. Ils ont ensuite été cultivés dans du facteur de croissance nerveuse (NGF), de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX), de l’acide ascorbique (AA) et du milieu de base pendant six jours. Nous avons également surveillé l’expression de marqueurs de différenciation neuronale avec PCR en temps réel.
Résultats: Les résultats de la PCR en temps réel ont montré que l’expression des gènes GFAP, MBP et MAP-2 après induction en deux étapes était significativement augmentée par rapport au protocole d’induction commun. De plus, notre étude a montré que la PR devrait jouer le rôle principal dans la différenciation neuronale et le devenir des CSM par rapport aux autres inducteurs neuronaux.
Conclusion : Pris ensemble, la combinaison de facteurs chimiques et de croissance dans le protocole d’induction en deux étapes peut améliorer l’efficacité de la différenciation des MSC en cellules progénitrices neurales, et peut être une nouvelle méthode pour l’application facile et rapide des MSC en médecine régénérative à l’avenir.
