Intermediate prevalence of hepatitis B virus infection among 1622 pregnant women in rural Burkina Faso and its implications for mother-to-child transmission.

Cadre d’étude et sélection des sujets

Cette étude fait partie d’une recherche longitudinale visant à évaluer la TME au Burkina Faso. Dans le cadre de cette recherche, nous avons mené une étude transversale auprès de femmes enceintes en consultation prénatale. Cette étude a été menée entre février et novembre 2021 dans trois centres de santé publique de premier niveau du district sanitaire de Yako, un milieu rural du nord du Burkina Faso. Les détails du cadre de l’étude sont décrits ailleurs^dix.

Tous les participants aux soins prénatals pendant la période d’étude ont été invités à participer. Une méthode d’échantillonnage consécutif a été appliquée et les femmes enceintes consentantes ont été soumises à un questionnaire sur leurs caractéristiques sociodémographiques. Le statut d’infection par le VIH a été obtenu à partir des dossiers médicaux. L’antigène de surface de l’hépatite B (HBsAg) a été testé à l’aide d’un point de service de diagnostic rapide très sensible avec une sensibilité analytique de 0,1 UI/mL (Determine HBsAg 2, Abbott Laboratories, IL, USA). Ensuite, des échantillons de taches de sang séché (DBS) ont été prélevés par piqûre au doigt de femmes enceintes HBsAg positives à l’aide du dispositif Hemaspot ™ (Spot on Sciences, CA, USA). Tous les échantillons de DBS ont été stockés à -20 degrés avant d’être expédiés au laboratoire d’analyse de l’Université d’Hiroshima, au Japon, pour des analyses sérologiques et moléculaires.

Tests sérologiques

Trois ailettes d’échantillons de DBS ont été détachées et éluées comme décrit précédemment¹¹, et analysé sur Lumipulse G1200 (Fujirebio Inc., Tokyo, Japon), un analyseur automatisé d’immunoessai enzymatique chimiluminescent (CLEIA). HBsAg, HBeAg et HBeAb ont été détectés à l’aide de Lumipulse® HBsAg-HQ, Lumipulse® HBeAg et Lumipulse® HBeAb, respectivement. La précision des échantillons de DBS pour détecter les séromarqueurs du VHB a été évaluée sur la base de notre étude publiée précédemment qui comparait des échantillons de DBS à des échantillons de sérum appariés¹². Les sensibilités rapportées pour HBsAg, HBeAg et HBeAb étaient respectivement de 89,3 %, 100 % et 100 %, avec une spécificité de 100 % pour tous les séromarqueurs.

Quantification de l’ADN du VHB et détermination du génotype

Une nageoire DBS a été prélevée pour extraire l’ADN du VHB à l’aide du kit SMITEST EX-R&D (Medical & Biological Laboratories Co., Ltd., Japon) et effectuer la quantification de l’ADN et l’identification du génotype.

L’ADN du VHB a été quantifié par réaction en chaîne par polymérase (PCR) en temps réel à l’aide du réactif TaqMan Fast Advanced Master Mix (Thermo Fisher Scientific, MA, États-Unis) sur Applied Biosystems StepOne (Thermo Fisher Scientific, MA, États-Unis).

À l’aide du kit PrimeScript One-Step RT-PCR Ver.2, l’ADN du VHB a été amplifié par PCR nichée ciblant la polymérase de surface (SP) qui se chevauche ou la région de surface du génome viral en cas d’échec de l’amplification de la région SP. Les produits de PCR ont ensuite été séquencés par la méthode de séquençage Sanger sur SeqStudio Sequence Analyzer (Thermo Fisher Scientific, MA, USA) à l’aide du kit de séquençage de cycle BigDye Terminator v3.1 (Thermo Fisher Scientific, CA, USA). Ensuite, les génotypes du VHB ont été identifiés en analysant des séquences partielles du génome avec 103 souches de référence extraites de GenBank, en utilisant la méthode de jonction voisine avec le logiciel Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 10 (Pennsylvania State University, PA, USA). Les arbres phylogénétiques résultants sont présentés dans les figures supplémentaires. S1 et S2. Le tableau supplémentaire S1 montre les amorces utilisées pour les réactions PCR nichées et le séquençage du génome^13,14.

Calcul de la taille de l’échantillon

La taille d’échantillon requise pour l’étude a été estimée à l’aide de la formule suivante : (mathrm{N}=frac{{1.96}^{2}times (mathrm{p}times (1-mathrm{p}))}{{mathrm{d}}^{2 }}times DEtimes frac{1}{R}), où N = taille de l’échantillon, p = proportion attendue, d = précision, DE = effet de conception, R = taux de réponse. Considérant une prévalence attendue (p) de 8,7 %¹⁵, une précision (d) de 2 %, un effet de conception (DE) de 1,5 et un taux de réponse (R) de 80 %, la taille d’échantillon minimale calculée était de 1 431. Nous avons finalement inclus 1622 femmes enceintes.

Gestion et analyse des données

Les données du questionnaire ont été recueillies sur des tablettes électroniques, encodées sur le Research Electronic Data Capture (RedCap, version 8.9.2) et transférées au serveur de l’Unité de recherche clinique de Nanoro. Les données ont ensuite été exportées vers Stata 16.1 (StataCorp LLC, TX, USA, 2020) pour la gestion des données et l’analyse statistique.

Les variables catégorielles sont présentées sous forme de nombres et de pourcentages, les variables continues sous forme de moyenne et d’écart-type ou de médiane et d’intervalle interquartile, selon le cas. Le test du chi carré a été utilisé pour comparer les variables catégorielles et le test de somme des rangs de Wilcoxon pour les variables continues.

Les facteurs associés à la prévalence de l’HBsAg ont été analysés par régression logistique multivariée avec comme cofacteurs les variables suivantes : tranche d’âge, antécédents de transfusion, chirurgie, piercing, scarification et MGF. En outre, la méthode pas à pas descendante a été utilisée pour sélectionner des cofacteurs supplémentaires parmi la profession, l’éducation, la parité, l’infection par le VIH et le fait d’avoir déjà entendu parler du VHB (probabilité d’entrée p< 0,25, probabilité d'élimination p< 0,3).

Le niveau de signification de toutes les analyses statistiques était de 0,05.

Considérations éthiques

L’étude a reçu l’approbation éthique du Comité national d’éthique du Burkina Faso (numéro d’approbation 2020-8-145) et du Comité d’éthique pour la recherche épidémiologique de l’Université d’Hiroshima (numéro d’approbation E-2137). L’étude a été réalisée conformément à la Déclaration d’Helsinki et à la réglementation du Burkina Faso. Le consentement éclairé a été obtenu de tous les participants à l’étude avant toute procédure d’étude. Les femmes enceintes positives pour l’infection par le VHB ont été suivies selon les directives sur la PTME du VHB au Burkina Faso.