Alfredo A. Sadun, MD, PhD, et ses collègues ont mené une étude post-mortem internationale sur des yeux humains traités avec une thérapie génique basée sur le virus adéno-associé (AAV2) pour la neuropathie optique héréditaire de Leber (NOHL). Les résultats ont été rapportés lors de la réunion annuelle de l’American Academy of Ophthalmology à San Francisco.
Selon le Dr Sadun, premier auteur, les résultats de l’étude ont fourni la première preuve moléculaire et cellulaire d’une transfection génique réussie des cellules ganglionnaires de la rétine chez l’homme. Fait intéressant, cet effet a été observé dans les deux yeux du patient, même si l’injection n’était qu’unilatérale. Le Dr Sadun est membre du Doheny Eye Institute de la faculté de médecine UCLA David Geffen de Los Angeles.
Thérapie génique AAV2 pour la NOHL
LHON est une maladie génétique mitochondriale cécitante héréditaire maternelle causée par la mutation m.11778G>A dans le ND4 gène. Le traitement par thérapie génique basée sur l’AAV2 compense la mutation m.11778G>A dans les cellules ganglionnaires rétiniennes affectées, ont expliqué les enquêteurs.
Tableau. Patients traités par une injection intravitréenne de lénadogène nolparvovec (AAV2-ND4) à 9×1010 vg dans un œil et une injection fictive dans l’autre œil.
L’étude en discussion incluait 2 patients de l’étude clinique RESCUE. Les patients ont été traités dans les 6 mois suivant une perte visuelle bilatérale par une injection intravitréenne de lénadogène nolparvovec (AAV2-ND4) à 9×1010 vg dans un œil et une injection fictive dans l’autre œil [Table].
Les enquêteurs ont effectué des analyses histopathologiques et moléculaires post-mortem des yeux en utilisant une immunohistochimie spéciale, une microdissection rétinienne au laser et une réaction en chaîne par polymérase numérique en gouttelettes.
Patients de l’étude
Le patient 1 était un homme de 29 ans ; le patient 2 était un homme de 22 ans. Les deux avaient une LHON causée par le m.11778G>A ND4 mutation. Le patient 1 est décédé d’une intoxication alcoolique aiguë. Le patient 2 est décédé d’un arrêt cardiaque.
Chez le patient 1, l’AAV2-ND4 le transgène était distribué dans les deux yeux mais principalement dans la rétine droite. Dans l’œil non injecté, une quantité minime de transgène a été trouvée (1 : 200). Cliniquement, 1 et 2 mois après le traitement, l’œil droit présentait une inflammation modérée de la chambre antérieure et du corps vitré ; à 6 mois et 1 an, aucune inflammation intraoculaire n’a été observée. La chambre antérieure contenait quelques anciens précipités de kératite pigmentée et des cellules pigmentées. À 6 mois, l’œil droit présentait des battements intermittents qui disparaissaient avec le sommeil ; à 1 an, les deux yeux brûlaient constamment et étaient photosensibles.
Sur le plan histopathologique, des zones focales d’inflammation ont été observées dans la rétine temporale, probablement à proximité du site d’injection, et, de manière significative, sous la forme d’une infiltration lymphocytaire chronique angiocentrique étendue au niveau de la tête du nerf optique. Ceci était en corrélation avec l’infiltration intraoculaire clinique.
Figure 1. Lames d’histopathe montrant l’infiltration lymphocytaire angiocentrique chronique à faible (UN)moyen (B) et haut (C) grossissement.
Les enquêteurs ont expliqué que le transgène dans la moitié interne de la rétine était environ 100 fois plus concentré que dans la rétine externe et qu’il était plus abondant sur la rétine temporale, près de la macula. Le transgène n’a pas été trouvé dans l’épithélium pigmentaire rétinien, la choroïde et le nerf optique.
En revanche, chez le patient 2, aucune zone focale d’inflammation n’a été observée dans la rétine ou dans la tête du nerf optique des deux yeux. Deux mois et un an après l’injection, l’œil gauche présentait une légère inflammation intraoculaire intermédiaire (pas de traitement concomitant).
Commentant les résultats, les auteurs ont déclaré : « L’efficacité de la quantité d’ADN pour le patient 2 était beaucoup plus élevée que pour le patient 1. Comme chez le patient 1, l’AAV2-ND4 un transgène a été trouvé dans la rétine des deux yeux. »
Les points clés tirés des 2 patients sont les suivants :
Chez le patient 1, une infiltration lymphocytaire a été observée au niveau de la rétine temporale et notamment autour des vaisseaux sanguins de la tête du nerf optique. [Figures 1A, 1B and 1C]. AAV2-ND4 la transfection rétinienne était évidente dans l’œil injecté et détectée à un niveau beaucoup plus bas dans l’œil controlatéral.
Chez le patient 2, en revanche, il n’y avait aucune preuve histopathologique d’inflammation persistante. Cependant, comme pour le patient 1, AAV2-ND4 le transgène a été trouvé dans la rétine des deux yeux et à peu près dans le même rapport de 200 (œil injecté) pour 1 (œil voisin). [Figure 2].
Figure 2. AAV2-ND4 distribution transgénique dans les deux yeux.
(Toutes les images sont une gracieuseté d’Alfredo A. Sadun, MD, PhD)
“Dans l’ensemble”, ont déclaré les enquêteurs, “cette étude fournit la première preuve d’une transfection génique réussie des cellules ganglionnaires de la rétine. Il est fascinant que cela se soit produit dans les deux yeux après une injection unilatérale et que d’autres expériences sur le chiasma optique et d’autres parties du cerveau du patient 2 sont en cours pour déterminer la voie de transfert.
Référence
1. Alfredo A. Sadun, Nancy J. Newman et al. Caractérisations histopathologiques et moléculaires dans les analyses post-mortem oculaires après thérapie génique AAV2 pour la NOHL. Affiche présentée lors de la réunion de l’American Academy of Ophthalmology ; du 3 au 6 novembre 2023 ; San Francisco, Californie.
Alfredo A. Sadun, MD, PhD | e-mail : [email protected]
Alfredo A. Sadun, MD, PhD, est titulaire de la chaire Flora L. Thornton Endowed et est chef du Doheny Eye Center-UCLA et vice-président d’ophtalmologie à UCLA. Il est récipiendaire de l’AAO Life Achievement Award et de l’ARVO Gold Fellow Award.
2023-12-01 08:04:17
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