13 Amélioration de la sensibilité dans l’identification des cancers du sein métastatiques exprimant ER et HER2 grâce à une combinaison d’analyse de biopsie liquide cellulaire et sans cellule

Arrière-plan

Les biopsies liquides sont une approche diagnostique non invasive pour détecter les cellules tumorales circulantes (CTC) ou l’ADN tumoral circulant (ctDNA) qui peuvent fournir des informations cliniquement exploitables pour guider les décisions de traitement pour les patientes atteintes d’un cancer du sein métastatique (MBC) lorsqu’une biopsie conventionnelle est autrement impossible. En outre, le développement des tests HER2 et ER devrait permettre l’identification des MBC exprimant HER2 susceptibles de bénéficier de nouvelles thérapies ciblées sur HER2. Nous rapportons ici une plate-forme complète de biopsie liquide comprenant l’expression immunofluorescente des protéines HER2 et ER dans les CTC (ctcIF) couplée à la détermination de l’amplification de ERBB2 par la génomique des CTC unicellulaires (ctcDNA) et les altérations de l’ADNct dans le plasma.

Matériels et méthodes

Des échantillons de sang de 247 patientes atteintes d’un cancer du sein métastatique ont été prélevés pour analyse d’ADN cellulaire et acellulaire. Du sang a également été prélevé auprès de 25 donneurs de sang (HD) sans antécédent de cancer connu comme témoins. Après isolement du plasma, les cellules nucléées ont été étalées et les lames ont été bio-banquées. La coloration immunofluorescente et l’imagerie ultérieure ont été réalisées sur des lames répliquées. Les CTC ont été identifiés à l’aide d’algorithmes d’imagerie numérique et d’apprentissage automatique d’Epic Sciences. L’isolement et le séquençage des CTC unicellulaires pour la quantification génomique des transitions d’état à grande échelle (LST) et des variantes du nombre de copies ERBB2 (CNV) ont été utilisés pour déterminer l’instabilité génomique et ERBB2amp dans les CTC individuels. Le plasma bio-banqué a été analysé pour détecter les altérations de l’ADNct avec une pertinence clinique élevée (Classe IA).

Résultats

La génomique ctcDNA était plus sensible que ctDNA pour détecter ERBB2amp chez les patients MBC (15 % et 2 %, respectivement). Une classification par biopsie liquide du statut HER2 en combinant les trois plates-formes (ctcIF, ctcDNA et ctDNA) a identifié que parmi les MBC), 15 % avaient le statut HER2 amplifié (ERBB2amp), 51 % avaient à la fois l’expression de la protéine ER et la protéine HER2 exprimant les CTC ( ERexp, HER2exp et ERBB2nonamp), 13 % étaient des CTC exprimant ER et n’exprimant pas HER2 (ERexp, HER2nonexp et ERBB2nonamp), 13 % étaient des CTC n’exprimant pas ER et exprimant HER2 (ERnonexp, HER2exp et ERBB2nonamp), 7 % n’exprimant ni ER ni HER2 CTC (ERnonexp, HER2nonexp et ERBB2nonamp).

conclusion

Cette plate-forme de biopsie liquide intègre une analyse CTC complète et l’ADNct pour signaler le statut HER2 et ER avec une spécificité et une sensibilité élevées chez les patients atteints de MBC. La génomique unicellulaire du ctcDNA est plus sensible que le ctDNA pour détecter ERBB2amp. Cette plate-forme a une utilité clinique potentielle dans la sélection de traitements appropriés pour le MBC sans biopsie tissulaire et/ou dans les lignes de traitement ultérieures parmi les sites tumoraux souvent biologiquement hétérogènes de la maladie métastatique.

AFFILIATIONS :

Joseph Di Caro,¹ Ernest Lam,¹ Kandra Horne¹ Stéphane Gluck,¹ Megan Slade,¹ Rick Wenstrup,¹ Lee Schwartzberg²

¹Sciences épiques, San Diego, Californie.

²Oncologie médicale et hématologie, Renown Institute for Cancer, Université du Nevada, Reno, NV.